什么是制劑影響因素試驗？2020版中國藥典原料藥物與制劑穩定性試驗指導原則（9001）規定，此項試驗是在比加速試驗更激烈的條件下進行，其目的是探討藥物的固有穩定性、了解影響其穩定性的因素及可能的降解途徑與降解產物，為制劑生產工藝、包裝、貯存條件和建立降解產物分析方法提供科學依據。其包括：高溫試驗、高濕試驗及強光照試驗。根據該指導原則影響因素試驗是制劑穩定性試驗的一部分，是申報資料中必須提供的研究內容。詭異的是CDE最新發布的《化學藥物（原料藥和制劑）穩定性研究技術指導原則（修訂）》中制劑并沒有要求提供影響因素試驗數據（僅提到光穩定性試驗）。兩個指導原則何以不一致？其中緣由我們無從知道，猜測可能是CDE想和ICH看齊，但國內藥典制定者還比較保守，還堅持以往的傳統。不管怎樣，如果我們打算在國內申報，還需要老老實實按照中國藥典要求提供全套影響因素數據。

僅僅提供數據倒也無妨，無非增加一些工作量，但具體操作上還是有一些比較值得研究的地方，比如樣品如何選擇、試驗條件如何設定、結果如何判定等。為了討論方便，本文主要以口服固體制劑為例進行討論。

首先來看相對比較清楚的光穩定性試驗。根據指導原則，一般選擇1批供試品進行試驗，除去外包裝，置光照條件下，使光照試驗的總照度不低于1.2×106Lux·hr、近紫外能量不低于200w·hr/m2，取樣檢測，如合格則停止試驗；如不合格，則啟動帶內包裝樣品重新放樣檢測，如合格則停止試驗；如帶內包裝樣品仍不合格，則啟動帶內包裝加外包裝的樣品重新放樣檢測，直至樣品檢測合格。也即試驗一直做到結果證明該制劑及其包裝能足以抵御光照為止。

其次討論指導原則規定比較模糊的高溫、高濕試驗。關于樣品的選擇，中國藥典是這么描述的“除去外包裝，并根據試驗目的和產品特性考慮是否除去內包裝，置適宜的開口容器中，進行高溫試驗、高濕試驗”。可見對于是否帶內包裝放置并沒有明確說明，需要根據具體項目確定。

關于高溫放置條件，中國藥典規定“高溫試驗供試品開口置適宜的恒溫設備中，設置溫度一般高于加速試驗溫度l0℃以上，考察時間點應基于原料藥本身的穩定性及影響因素試驗條件下穩定性的變化趨勢設置。通常可設定為0天、5天、10天、30天等取樣，按穩定性重點考察項目進行檢測。若供試品質量有明顯變化，則適當降低溫度試驗。”可見，高溫試驗的溫度和放置時間也是根據具體項目確定的。

關于高濕條件中國藥典規定“試驗供試品開口置恒濕密閉容器中，在25℃分別于相對濕度90%±5%條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，按穩定性重點考察項目要求檢測，同時準確稱量試驗前后供拭品的重量，以考察供試品的吸濕潮解性能。若吸濕增重5%以上，則在相對濕度75%±5%條件下，同法進行試驗；若吸濕增重5%以下，其他考察項目符合要求，則不再進行此項試驗。恒濕條件可在密閉容器，如干燥器下部放置飽和鹽溶液，根據不同相對濕度的要求，可以選擇NaCl飽和溶液（相對濕度75%±1%，15.5～60℃ )，KNO3飽和溶液（相對濕度92.5%，25℃)。”可見，高濕試驗的放置濕度高低也是可以調整的。

那么問題來了，高溫、高濕試驗究竟應該怎么選擇試驗條件呢，需要同光穩定性試驗一樣，一直做到結果證明該制劑及其包裝能足以抵御高溫、高濕的影響嗎？回答這個問題之前我們還是要明確影響因素研究的目的上，回到藥典設定該項考察的初衷，即“其目的是探討藥物的固有穩定性、了解影響其穩定性的因素及可能的降解途徑與降解產物，為制劑生產工藝、包裝、貯存條件和建立降解產物分析方法提供科學依據。”因此，制劑高溫、高濕條件不一定要全部合格，或者說該項試驗是一種考察項，考察產品的變化趨勢，研究制劑對高溫、高濕的敏感程度，與此同時也通過檢測這些降解后的樣品來驗證分析方法的適用性。產品質量是否符合要求，最終還是要靠穩定性實驗結果來判定，而不是影響因素。

在明確了高溫、高濕影響因素條件的研究目的后，我想我們的實驗條件的選擇也就比較清楚了。而不是像一些研究者那樣程序化、機械的進行試驗研究，浪費很多時間和資源，比如開始就先上裸置樣品，不合格再加包裝，不行再繼續降低溫度、濕度條件，直到檢測合格為止。在選擇影響因素條件時，建議考慮以下幾個因素：

1. 產品說明書上儲存條件

如果產品說明書建議在30℃以下儲藏，說明這類產品對溫度可能沒那么敏感，影響因素可以選擇60℃考察。

例：Anastrozole原研說明書儲存條件推薦在30℃以下儲藏，處方開發階段研究也顯示其比較穩定，且其溶出非常快（15min溶出大于85%），因此在進行影響因素試驗時，可以選擇去除內包裝，高溫60℃考察。

2. 比較容易水解的產品

一些產品結構帶有酰胺鍵或者酯鍵等容易水解的結構，在進行影響因素試驗時可以考慮帶包裝進行。

例：比如頭孢菌素類產品、普利類產品等特別容易水解，在進行影響因素研究時沒必要再去除包裝，這類產品非常不穩定，去除包裝樣品降解會非常嚴重，會產生很多次生代謝產物，這樣的考察已經失去了研究的意義。

3. 輔料的影響

對于膠囊產品我們知道膠囊殼本身含有相當的水分，且在不同放置條件下吸水或者失水會非常嚴重。對于某些容易水解的樣品，如果影響因素高溫采用包裝條件，那么在局部微環境下膠囊殼就成了濕度發生器，降解會非常嚴重，會誤導我們對影響條件的判斷。

參考文獻：

1.《化學藥物（原料藥和制劑）穩定性研究技術指導原則（2015年第3號）》

2. ICH《新原料藥和制劑的穩定性試驗Q1A（R2）》

3. 成海平，高建青，霍秀敏. 影響因素試驗在藥物研發中的作用及其關注點[J]. 中國藥學雜志，2008,43（2）：158-160

4．2020版中國藥典