眾所周知，原料藥開發中雜質的制備是一項耗時耗力的工作任務，特別是微生物發酵來源的產物中，雜質含量多，結構相似性大，很多都是同分異構體，常規分離手段分離難度大，開發快速有效的目標雜質分離制備方法是原料藥工藝開發者的目標。隨著技術的進步，涌現了各種各樣的分離純化手段，本文在這簡單介紹下常用的技術手段。

1.結晶法

結晶是利用雜質和目標化合物在同一溶劑中的 溶解度或溶解度隨溫度的變化趨勢不同而進行分離純化的手段。因結晶操作方便，儀器設備要求不高，投資少，產品純度高，是實驗室雜質制備中首先考慮的方法。

2.制備色譜法

層析利用各種物質在固定相與流動相之間不同的分配比例，達到分離目的。根據固定相和流動相的不同，層析有很多類型，如正相層析、反相層析、離子色譜、凝膠色譜等。根據系統運行壓力的不同，又分為低壓層析、中壓層析、高壓層析等。層析對生物大分子如蛋白質和核酸等復雜的有機物的混合物的分離分析有極高的分辨力，選到合適的填料后，成功的 機會已經達到了一半以上。目前對于分離難度大，少量雜質的制備，在結晶等工藝無法得到時，大多考慮利用中高壓制備液相來實現。

3.沉淀法

利用雜質和目標化合物化學性質的不同，使雜質或目標化合物與適當試劑反應，生成沉淀，通過過濾等方法而分開。在原料藥分離提取工藝的開發中，一旦找到這種方法，對工藝的改進往往是革命性的，省掉大量的設備，縮短工藝，提高產品品質。

4.高速逆流色譜法

高速逆流色譜是建立在單向性流體動力平和體系之上的一種逆流色譜分離方法，由于溶劑系統的組成及配比可以是無限多的，所以從理論上來講可以適用于任何極性范圍內樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失，特別適用于分離極性物質。該技術現應用廣泛，在抗生素單組分的分離純化中效果很好。

5.超臨界流體萃取（SFE，簡稱超臨界萃取）

超臨界萃取是一種利用超臨界流體作為萃取劑，把一種成分（萃取物）從混合物（基質）中分離出來的技術。二氧化碳是最常用的超臨界流體。

該技術原理是超臨界流體對脂肪酸、生物堿、醚類、酮類、甘油酯等具有特殊溶解作用，利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關系，即利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響而進行的。在超臨界狀態下，將超臨界流體與待分離的物質接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點高低和分子量大小的成分依次萃取出來。當然，對應各壓力范圍所得到的萃取物不可能是單一的，但可以控制條件得到最佳比例的混合成分，然后借助減壓、升溫的方法使超臨界流體變成普通氣體，被萃取物質則完全或基本析出，從而達到分離提純的目的，所以超臨界流體萃取過程是由萃取和分離組合而成的（該部分來自百度）。

目前各種新的技術手段越來越多，我們研發工作者，一定要在分析清楚目標雜質和所在體系的物化特性后，利用其體系的特性來選擇合適的方法實現快速分離。