環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證的內(nèi)容、方法、步驟

 

一次性無菌醫(yī)療產(chǎn)品的環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證的主要內(nèi)容應(yīng)根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)：GB18279.1-2015 《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 環(huán)氧乙烷 第 1 部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認(rèn)和常規(guī)控制的要求》中的規(guī)定；同時(shí)環(huán)氧乙烷是有毒的易燃易爆氣體，應(yīng)特別注意有關(guān)的安全性和有效性。

 

一、驗(yàn)證前準(zhǔn)備

 

1、驗(yàn)證方案

 

環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證一般應(yīng)包含編制驗(yàn)證計(jì)劃、選用驗(yàn)證方法、確認(rèn)檢驗(yàn)或試驗(yàn)方法、評(píng)價(jià)驗(yàn)證結(jié)果等方面內(nèi)容。其中編制驗(yàn)證計(jì)劃時(shí)確定驗(yàn)證的步驟是非常重要的。通常的驗(yàn)證步驟是：

2、人員

 

應(yīng)當(dāng)由有資格的人員來從事環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證過程中的操作工作、微生物檢驗(yàn)工作、設(shè)備管理工作及計(jì)量器具的管理工作。負(fù)責(zé)上述工作的人員應(yīng)根據(jù)工作需要分別接受過相應(yīng)內(nèi)容的培訓(xùn)：設(shè)備的安裝、操作、維護(hù)；計(jì)量器具校準(zhǔn)；物理性能及微生物性能鑒定。

 

人員的資格培訓(xùn)應(yīng)建立相應(yīng)的培訓(xùn)情況記錄，每套環(huán)氧乙烷滅菌設(shè)備的操作人員應(yīng)至少兩人，并取得設(shè)備操作上崗證。

 

3、產(chǎn)品滅菌的適用性

 

滅菌前應(yīng)根據(jù)環(huán)氧乙烷滅菌的特性分析產(chǎn)品對環(huán)氧乙烷滅菌的適用性（方法驗(yàn)證）。產(chǎn)品的滅菌適用性包括：

 

產(chǎn)品：

 

由產(chǎn)品的用途決定產(chǎn)品是否需要滅菌；

 

產(chǎn)品材料的物理、化學(xué)性能：

 

環(huán)氧乙烷滅菌的環(huán)境不應(yīng)改變材料的物理化學(xué)性能。

 

產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

 

產(chǎn)品結(jié)構(gòu)應(yīng)使環(huán)氧乙烷滅菌氣體能夠到達(dá)需滅菌位置。環(huán)氧乙烷滅菌的條件不應(yīng)改變產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)。

 

產(chǎn)品殘留量：

 

產(chǎn)品經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后的 EO 殘留水平將會(huì)影響產(chǎn)品對滅菌的適用性。解析后 EO 殘留量應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)。

 

產(chǎn)品再滅菌性：

 

當(dāng)產(chǎn)品需要再次滅菌時(shí)產(chǎn)品的物理化學(xué)性能不受影響，產(chǎn)品的 EO 殘留量仍符合相關(guān)要求。

 

產(chǎn)品最難滅菌部位：

 

根據(jù)產(chǎn)品的設(shè)計(jì)確定滅菌劑最難達(dá)到的部位（在最難位置放置菌菌片，可以用坑性對比、也可以采用特殊結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)）。

 

4、包裝

 

1）包裝說明：

 

應(yīng)包含包裝名稱、包裝材料、包裝結(jié)構(gòu)說明及包裝的印刷。應(yīng)證明包裝上的印刷不會(huì)因滅菌而產(chǎn)生不良影響。

 

2）包裝的物理化學(xué)性能：

 

證明包裝經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后其物理、化學(xué)性能能夠達(dá)到包裝設(shè)計(jì)的預(yù)期要求。

 

3）包裝的封口強(qiáng)度：

 

應(yīng)證明產(chǎn)品包裝在滅菌環(huán)境下封口強(qiáng)度能保證包裝的正常功用。

 

4）包裝的阻菌性：

 

應(yīng)證明產(chǎn)品的包裝能確保滅菌后的產(chǎn)品不會(huì)受外界微生物污染源的影響。

 

5）包裝的儲(chǔ)存驗(yàn)證確認(rèn)；

 

6）包裝的運(yùn)輸試驗(yàn)；

 

7）包裝的老化試驗(yàn)；

 

8）再次滅菌的影響：

 

9）包裝應(yīng)有利于濕度和環(huán)氧乙烷的穿透；

 

應(yīng)證明產(chǎn)品的包裝經(jīng)再次滅菌后其物理化學(xué)性能、封口強(qiáng)度、印刷等均保持其正常功用。

 

5、化學(xué)指示物

 

化學(xué)指示物的選用應(yīng)符合 GB18282.1-2015 標(biāo)準(zhǔn)要求，并審核供貨商資質(zhì)。

 

6、生物指示物

 

生物指示物的選用應(yīng)符合 GB18282.2-2015 標(biāo)準(zhǔn)要求，并審核供貨商資質(zhì)。

 

7、滅菌劑

 

滅菌用環(huán)氧乙烷應(yīng)符合 GB13098-2006 標(biāo)準(zhǔn)要求；質(zhì)保單、滅菌劑配方、生產(chǎn)日期、有效期限、保存條件等產(chǎn)品資料并核實(shí)。

 

8、產(chǎn)品的初始污染菌

 

產(chǎn)品在滅菌前必須進(jìn)行產(chǎn)品的初始污染菌測試，確定產(chǎn)品從包裝完畢至滅菌循環(huán)開始前的最長滯留時(shí)間。

 

9、加濕用蒸汽

 

加濕用蒸汽須保證不能成為新的微生物污染源，建議用去純化水，若不能達(dá)到，可以進(jìn)入包裝的狀態(tài)去評(píng)估。

 

二、安裝驗(yàn)證

 

1、設(shè)備的相關(guān)技術(shù)資料

 

需提供設(shè)備的使用說明書、產(chǎn)品合格證、安全規(guī)程、維護(hù)保養(yǎng)計(jì)劃、常見故障與排除一覽表、主要技術(shù)圖紙（安裝圖、管道圖、電氣圖）、備品備件表等主要技術(shù)資料。

 

2、計(jì)量器具校驗(yàn)

 

滅菌設(shè)備上的主要計(jì)量器具，如：溫度傳感器、壓力傳感器、濕度傳感器等，在滅菌驗(yàn)證過程中要保證其相應(yīng)的準(zhǔn)確性，其精度符合等級(jí)要求。計(jì)量器具必須在規(guī)定的鑒定周期內(nèi)使用。計(jì)量器具的使用必須具備計(jì)量器具生產(chǎn)許可證、計(jì)量器具產(chǎn)品合格證及相關(guān)的合格證明材料。（傳感器送檢測合格不代表安裝在設(shè)備上也合格，最理想的方式是在線校準(zhǔn)）。

 

3、滅菌器供應(yīng)商的資質(zhì)證明

 

需提供滅菌器供應(yīng)商的工商營業(yè)執(zhí)照、醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證、醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊證和醫(yī)療器械衛(wèi)生許可證。

 

4、環(huán)境要求

 

滅菌車間須達(dá)到防爆要求；應(yīng)安裝防爆排風(fēng)扇；車間遠(yuǎn)離明火至少 30 米以上；應(yīng)離開辦公區(qū)及其他生產(chǎn)區(qū)；環(huán)氧乙烷儲(chǔ)存鋼瓶應(yīng)固定支撐、連接地線、專用房間并通風(fēng)陰涼；車間空氣中環(huán)氧乙烷的濃度應(yīng)≤2mg/m3（GB11721-89 標(biāo)準(zhǔn)）。

 

控制室應(yīng)為正壓通風(fēng)室，室內(nèi)設(shè)有的報(bào)警裝置應(yīng)完好有效， 室內(nèi)壓力的指示和氣源風(fēng)機(jī)的開停均應(yīng)正常有效

 

5、管道的安裝

 

滅菌器各種管道應(yīng)根據(jù)其功能標(biāo)色區(qū)分，并在顯著位置有相應(yīng)標(biāo)志。滅菌器各管道的連接應(yīng)保證密封、無泄漏。各管道間應(yīng)保證相應(yīng)的平行、等距、垂直連接。滅菌器管道與相應(yīng)的控制系統(tǒng)、輔助系統(tǒng)間應(yīng)按安裝位置圖正確安裝。

 

6、電器控制系統(tǒng)的安裝

 

滅菌器中開關(guān)、按鍵、指示燈、控制儀表、指示儀表、傳感器等電器的安裝應(yīng)正確，電器控制系統(tǒng)應(yīng)可靠接地。可通過啟閉開關(guān)、按鈕，檢查儀表顯示的正確性加以驗(yàn)證。

 

防爆電氣設(shè)備的技術(shù)文件應(yīng)齊全，并具有防爆工程安裝質(zhì)量控制記錄和安裝質(zhì)量合格結(jié)論報(bào)告。

 

7、計(jì)算機(jī)系統(tǒng)的安裝（若有）

 

檢查主機(jī)、顯示器、打印機(jī)、UPS、控制機(jī)箱的可靠安裝、正確連接和正常運(yùn)行。

 

三、運(yùn)行驗(yàn)證（1）

 

1、輔助設(shè)備的運(yùn)行驗(yàn)證

 

輔助設(shè)備包括真空系統(tǒng)、氣泵、循環(huán)泵、加藥系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)（水箱、電熱管）、蒸汽發(fā)生器（若有）、開關(guān)門系統(tǒng)等，根據(jù)各輔助設(shè)備應(yīng)有的工作特性，分別接通電源試運(yùn)轉(zhuǎn)，驗(yàn)證各輔助設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)的有效性，并根據(jù)設(shè)計(jì)確認(rèn)，進(jìn)行限挑戰(zhàn)驗(yàn)證。

 

2、電器控制系統(tǒng)的運(yùn)行驗(yàn)證

 

電器控制系統(tǒng)包括加熱系統(tǒng)、壓力系統(tǒng)、氣化系統(tǒng)，需驗(yàn)證加熱（水箱）溫度、滅菌溫度、滅菌壓力、氣化器溫度（若有）的上下限控制，要求各儀表控制正確、可靠。

 

3、報(bào)警系統(tǒng)的運(yùn)行驗(yàn)證

 

應(yīng)驗(yàn)證滅菌室超高溫報(bào)警，滅菌室超高壓報(bào)警，氣化器（若有）超高溫報(bào)警，滅菌劑（若有）超低溫報(bào)警，計(jì)時(shí)器超時(shí)報(bào)警及開關(guān)門報(bào)警（若有）。要求報(bào)警裝置正確、有效。

 

4、計(jì)算機(jī)系統(tǒng)的運(yùn)行驗(yàn)證

 

應(yīng)驗(yàn)證計(jì)算機(jī)系統(tǒng)各部件，包括主機(jī)、顯示器、打印機(jī)、UPS、控制機(jī)箱等運(yùn)行的正確性，要求能正常運(yùn)性，達(dá)到預(yù)期功能。

 

  四、運(yùn)行驗(yàn)證（2）

 

1、真空速率試驗(yàn)

 

驗(yàn)證真空度達(dá)到-15Kpa、-50Kpa 所需的時(shí)間，要求抽-15Kpa 時(shí)≤6min，抽-50Kpa 時(shí)≤30min。

 

注：本指南中所指的壓力均指相對壓力。

 

2、正壓泄漏試驗(yàn)

 

驗(yàn)證滅菌器柜體在正壓狀態(tài)下的密封性。在空載、溫度恒定的條件下，加正壓至+50Kpa（高于滅菌過程最大壓力），保壓 60min（可根據(jù)實(shí)際情況應(yīng)適當(dāng)延長），觀察柜體壓力變化，要求泄漏率≤0.1Kpa/min（此要求略低，大設(shè)備可適當(dāng)提高要求）。有些大型設(shè)備滅菌工藝無正常情況,可降低正壓要求.

 

3、負(fù)壓泄漏試驗(yàn)

 

驗(yàn)證滅菌器柜體在負(fù)壓狀態(tài)下的密封性。在空載、溫度恒定的條件下，預(yù)真空至-50Kpa（高于滅菌過程最大壓力），保壓 60min（可根據(jù)實(shí)際情況應(yīng)適當(dāng)延長），觀察柜體壓力變化，要求泄漏率≤0.1Kpa/min（此要求略低，大設(shè)備可適當(dāng)提高要求）。

 

4、加濕試驗(yàn)

 

加濕能力可以和空間溫濕度均勻性一起做。

 

5、滅菌室箱壁溫度均勻性試驗(yàn)

 

驗(yàn)證滅菌室箱壁溫度均勻性是否符合要求。

 

1）溫度探頭應(yīng)均勻分布于整個(gè)滅菌器中，考慮設(shè)備進(jìn)水回水冷熱點(diǎn)。

 

2）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求得少于下傳感器數(shù)量：

 

a)滅菌器柜室可用體積≤1 m3時(shí)，至少 3 個(gè)；

 

b)滅菌器柜室可用體積≥3 m3時(shí)，體積每增加 1m3時(shí)，增加 1 個(gè)測點(diǎn)；

 

3）啟動(dòng)加熱/循環(huán)系統(tǒng)，在到達(dá)滅菌工藝所需溫度（如 50℃）時(shí)，記錄所有傳感器的溫度值。

 

4）所有溫度傳感器間與驗(yàn)證要求溫度的偏差≤±3℃。

 

5）空載滅菌室箱壁溫度均勻性驗(yàn)證的溫度傳感器分布須有示意圖表示。

 

6、滅菌室空間溫、濕度均勻性試驗(yàn)

 

驗(yàn)證滅菌室空間溫濕度均勻性是否符合要求。

 

1）在空滅菌室內(nèi)放置規(guī)定數(shù)量的溫、濕度傳感器，溫度探頭應(yīng)放置于能代表溫度變化最大的部位。

 

2）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求不得少于以下傳感器數(shù)量：：

 

a)滅菌器柜室可用體積≤1m3時(shí)，至少 3 個(gè)溫度，2 個(gè)濕度傳感器，均勻分布；

 

b)滅菌器柜室可用體積>3m3時(shí)，體積每增加 1 m3時(shí)，增加 1 個(gè)溫度測點(diǎn)；

 

c)滅菌器柜室可用體積>5m3時(shí)，體積每增加 2.5 m3時(shí)，增加 1 個(gè)濕度測點(diǎn)；。

 

3）啟動(dòng)加熱/循環(huán)（自動(dòng)），在到達(dá)滅菌工藝所需溫度（如 50℃）時(shí)，記錄所有傳感器的溫度值，并找到冷點(diǎn)熱點(diǎn)。

 

4）標(biāo)準(zhǔn)要求所有溫度傳感器滿足設(shè)定溫度偏差≤±3℃。

 

5）空載滅菌室空間溫、濕度均勻性驗(yàn)證的溫度傳感器分布須有示意圖表示。

 

7、滅菌室滿載溫、濕度均勻性試驗(yàn)（可以與微生物驗(yàn)證一起做，第一次驗(yàn)證時(shí)此驗(yàn)證有利于尋找滅菌工藝）

 

驗(yàn)證滅菌室滿載時(shí)溫度均勻性是否符合要求。

 

1）在滅菌室滿載的條件下，將規(guī)定數(shù)量的溫度傳感器（計(jì)算方法同上）均勻地分布在滅菌負(fù)載包裝箱內(nèi)，啟動(dòng)加熱/循環(huán)系統(tǒng)，在到達(dá)滅菌工藝所需溫度（如 50℃）時(shí)，記錄所有傳感器的溫度值。

 

2）應(yīng)規(guī)定所有溫度傳感器間溫度的最大偏差并對數(shù)據(jù)行分析。

 

3）滅菌室負(fù)載要有裝載模式圖。

 

五、微生物性能驗(yàn)證（MPQ、PPQ）

 

微生物性能驗(yàn) 證在運(yùn)行驗(yàn)證合格后進(jìn) 行。它驗(yàn)證現(xiàn)用環(huán)氧乙 烷滅菌工藝是否符 合

 

GB18279.1-2015《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 環(huán)氧乙烷 第 1 部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認(rèn)和常規(guī)控制的要求》標(biāo)準(zhǔn)。

 

對新產(chǎn)品、新材料、新包裝、新工藝的使用，通過滅菌驗(yàn)證為滅菌工藝的制定提供依據(jù)。

 

PCD: 過程挑戰(zhàn)器具, 設(shè)計(jì)成對滅菌過程具有確定的抗力，用于評(píng)估過程性能的器具。

 

IPCD: 內(nèi)部 PCD 被用來證明指定的產(chǎn)品已達(dá)到無菌保證水平。放置于產(chǎn)品內(nèi)部或銷售包裝內(nèi)的

 

PCD 是一個(gè)內(nèi)部的 PCD.

 

EPCD: 放置于產(chǎn)品銷售包裝之間或裝載的外表面上的 PCD 是外部 PCD。外部 PCD 只是用來日常

 

生產(chǎn)過程的微生物監(jiān)測。

 

產(chǎn)品族: 可以用規(guī)定的過程條件滅菌的，類似加工特性的產(chǎn)品系列.

 

加工組: 能一起滅菌的不同產(chǎn)品或產(chǎn)品族的組合.

 

影響環(huán)氧乙烷滅菌的因素很多，主要有溫度、環(huán)氧乙烷濃度、相對濕度、時(shí)間等。

 

1、溫度

 

環(huán)氧乙烷的殺菌作用、滅菌時(shí)間、對物品的穿透能力與溫度密切相關(guān)。在一定的范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，環(huán)氧乙烷的殺菌作用加強(qiáng)，同時(shí)也能增強(qiáng)其穿透力和縮短滅菌作用的時(shí)間。一般口罩常用的合適溫度為 50±5℃（透析包裝可走上限，非透析包裝走下限）。溫度每提高 10℃滅菌時(shí)間縮短一半。

1）加溫系統(tǒng)溫度與均勻性

 

環(huán)氧乙烷滅菌柜以熱水循環(huán)方式加熱，每年都應(yīng)做運(yùn)行確認(rèn)。

 

2）處理（負(fù)載試驗(yàn)）應(yīng)在受控條件下進(jìn)行一段時(shí)間的預(yù)處理和（或）處理，使被滅菌物品內(nèi)達(dá)到規(guī)定溫度和相對濕度。它同以下因素有關(guān)：

 

產(chǎn)品；規(guī)格（長*寬*高）；數(shù)量（箱）；總載量（<70%）；

 

堆放：裝載物品不能接觸柜壁，有一定距離間隔,作圖示。

 

小包裝材料：大小、厚度；

 

中包裝材料：大小、厚度、含小包裝數(shù)；

 

大包裝材料：尺寸、含中包裝數(shù)；

 

水箱溫度（℃）；被滅菌物品的溫度（℃）；

 

3）根據(jù)鑒定的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),通常進(jìn)行這類測量的溫度傳感器數(shù)量與空載時(shí)相同。

 

4）溫度和濕度傳感器應(yīng)裝入單個(gè)包裝箱內(nèi)和其他擬放入滅菌器中任何形式的包裝內(nèi)。

 

5）溫度傳感器應(yīng)放置于能代表溫度變化最大的部位,如靠近柜室不受熱的位置或柜門和靠近蒸汽或氣體入口位置。其余的溫度探頭均勻分布于整個(gè)滅菌器中，并作圖示。

 

6）全部滅菌時(shí)間內(nèi)，被滅菌物品應(yīng)達(dá)到規(guī)定的最低溫度，在氣體作用期間的任何指定時(shí)間，產(chǎn)品上的溫度波動(dòng)范圍應(yīng)小于或等于 10℃，濕度應(yīng)不超過±15%。

 

7）溫度的設(shè)定要考慮對滅菌物品、包裝及印刷的影響。

 

8）通過試驗(yàn)要得到不同位置升溫速率，要表明溫度最低點(diǎn)與最高點(diǎn)的位置，同時(shí)要探求溫度與滅菌效果的關(guān)系。

 

9）環(huán)境溫度的影響，我國的環(huán)境溫度變化很大，不同地區(qū)、不同季節(jié)環(huán)境溫度影響預(yù)處理所需時(shí)間。

 

10）規(guī)定經(jīng)最長允許時(shí)間預(yù)處理后被滅菌物品的溫、濕度。

 

11）滅菌溫度參數(shù)確定,應(yīng)根據(jù)環(huán)境溫度,被滅菌物品的溫度、升溫速率、時(shí)間等確定。

 

12）從預(yù)處理區(qū)內(nèi)移出被滅菌物品到滅菌周期開始經(jīng)過的最長時(shí)間。（通常認(rèn)為移出時(shí)間 60min或更少為可行。

 

13）短周期采用常規(guī)溫度，半周期采用工藝下限溫度、全周期采用上限溫度。

 

2、預(yù)真空

 

預(yù)真空度的大小決定殘留空氣的多少，而殘留空氣可直接阻止環(huán)氧乙烷氣體、熱、濕氣到達(dá)被滅菌物品的深層、內(nèi)部。所以滅菌過程尤其是加濕前真空度對滅菌效果影響巨大，為使 EO 在滅菌器柜室和被滅菌物品內(nèi)均勻分布達(dá)到可以重現(xiàn)，加入滅菌劑之前必須控制柜內(nèi)殘留空氣的含量。采用高度真空排出空氣有利于 EO 氣體進(jìn)入產(chǎn)品內(nèi)部（透析包裝）。而對于那些不能承受高度真空排出空氣的產(chǎn)品，采用低真空，更長的滅菌時(shí)間。

 

預(yù)真空要考慮以下因素的影響：

 

 1）對被滅菌物品，包裝的影響；

 

 2）環(huán)氧乙烷的均勻性；與被滅菌物品堆放，滅菌柜設(shè)計(jì)可能有關(guān)。

 

 3）負(fù)壓滅菌與正壓滅菌；

 

 4）對濕度的影響；

 

5）設(shè)定真空度與達(dá)到該真空度所需時(shí)間（真空速率）；

 

6）真空持續(xù)時(shí)間（保壓）。

 

3、加濕

 

濕度影響滅菌效果，當(dāng)濕度為 0%RH 時(shí)，沒有滅菌效果，濕度為 99。9%RH 時(shí)效果極差，在 40-75%RH的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，濕度影響無規(guī)律：

 

 1）只充許采用蒸汽作為加濕方式；

 

 2）加入蒸汽不得成為新的污染源。

 

 3）加濕前排除冷凝水；

 

 4）加濕是為了補(bǔ)償真空損失的水；

 

5）濕度有利于環(huán)氧乙烷穿透。

 

6）加濕也應(yīng)當(dāng)挑戰(zhàn)，短周期正常加濕，半周期下限，全周期上限。

 

7）加入蒸汽時(shí)濕度與壓力升高的關(guān)系

 

8）非透析包裝無論如何加濕也不能改變產(chǎn)品內(nèi)的濕度。

 

4、環(huán)氧乙烷濃度

 

口罩滅菌工藝不適合采用較低濃度，滅菌濃度提高一倍，滅菌時(shí)間縮短一半，超過一定深度不再縮短時(shí)間。

 

1）環(huán)氧乙烷加入量、加入時(shí)所需的時(shí)間、達(dá)到最高壓力時(shí)間與換氣前的最終壓力。

 

2）滅菌柜內(nèi)的環(huán)氧乙烷濃度

 

環(huán)氧乙烷的濃度可以用間接法或直接法來監(jiān)測。間接法可用稱重法和壓力測量法計(jì)算其濃度；直接法可直接采樣用氣相色譜及遠(yuǎn)紅外分析的方法測得其濃度。

 

a)稱重法：假設(shè)環(huán)氧乙烷和稀釋氣體均勻分散地進(jìn)入容器并沒有氣體從腔體漏出，稱取氣體鋼瓶在加 EO 前后的重量差異，計(jì)算出環(huán)氧乙烷濃度。

 

b)壓力測量法計(jì)算環(huán)氧乙烷濃度

 

在初次充氣的氣體達(dá)到溫度平衡時(shí)滅菌柜內(nèi)環(huán)氧乙烷濃度的理論計(jì)算是理想氣體定律為基礎(chǔ)。引入 E.O 后，滅菌器內(nèi) E.O 濃度計(jì)算方法：Americon National Standand ST24-1992

 

 計(jì)算公式：E.O 濃度=（K*P）/（R*T）

 

 K：E.O 稀釋常數(shù)

 

 P：引入 E O 后壓力上升值

 

 R：氣體常數(shù)

 

 T：引入 E.O 后，箱體內(nèi)絕對溫度

 

c)氣相色譜法（GC）

 

d) 紅外分析

 

大多數(shù)氣體具有一定特征遠(yuǎn)紅外光譜，可用鑒別氣體并測定所含氣體量。

 

3)環(huán)氧乙烷對不同包裝、被滅菌物品的穿透性，在滅菌周期，觀察環(huán)氧乙烷穿透包裝與被滅菌物品到達(dá)內(nèi)腔所需時(shí)間與含量。

 

4)滅菌周期完成后，進(jìn)入被滅菌物品小包裝內(nèi)環(huán)氧乙烷的量，由此可以驗(yàn)證生物指示劑、化學(xué)指示劑與滅菌柜內(nèi)環(huán)氧乙烷均勻性。

 

5)環(huán)氧乙烷的解析曲線

 

滅菌周期完成后，被滅菌物品在一定條件下（溫度、時(shí)間、通風(fēng)），可由環(huán)氧乙烷殘留量消失與時(shí)間（天）的曲線，得出殘留量達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)所需時(shí)間。

 

檢測方法：化學(xué)法；氣相色譜法（CE 要求）。

 

不同季節(jié)的環(huán)氧乙烷消失曲線不同。觀察被滅菌物品，在不同季節(jié)（溫、濕度）消失的濃度與時(shí)間（天）曲線。注意樣品的保存。

 

5、換氣

 

抽真空，去除滅菌劑應(yīng)根據(jù)對產(chǎn)品與包裝的影響，設(shè)定規(guī)定壓力（速率與時(shí)間）。

 

換氣的次數(shù)與加入清潔空氣至大氣壓力。

 

應(yīng)基本去除滅菌柜內(nèi)的環(huán)氧乙烷。

 

出料應(yīng)開啟排風(fēng)系統(tǒng)，保護(hù)操作員工避免吸入環(huán)氧乙烷。

 

6、通風(fēng)（解析）

 

產(chǎn)品應(yīng)放置在規(guī)定條件下，持續(xù)通風(fēng)一段時(shí)間。

 

通風(fēng)可在滅菌器內(nèi)和（或）單個(gè)柜室或房間內(nèi)進(jìn)行。

 

EO 及其反應(yīng)產(chǎn)物的殘留物可能是有害的。生產(chǎn)廠必須認(rèn)識(shí)到產(chǎn)品中可能有殘留物存在。溫度、停放時(shí)間、強(qiáng)制氣體循環(huán)、裝載特性、產(chǎn)品與包裝材料都對通風(fēng)的效果有影響。

 

測定通風(fēng)區(qū)溫度分布的方法，應(yīng)與推薦的測定預(yù)處理區(qū)溫度分布的方法相同。應(yīng)測定通風(fēng)區(qū)的

 

氣流速度和氣流分布圖。

 

通風(fēng)：

 

a）時(shí)間和溫度；

 

b）柜室內(nèi)和（或）房間內(nèi)壓力的改變（如有改變）；

 

c）空氣或其他氣體所換氣速度；

 

d）被滅菌物品的溫度和；

 

e）柜室內(nèi)和（或）空間內(nèi)產(chǎn)品的擺放方式和分隔形式。

 

7、微生物

 

除非能證明與以前經(jīng)確認(rèn)的產(chǎn)品、包裝或被滅菌物品擺放方式等效，否則必須采用新的或更改過的產(chǎn)品、包裝、被滅菌物品擺放方式、設(shè)備或過程參數(shù)進(jìn)行微生物性能鑒定。對等效性的證明，應(yīng)形成文件。

 

對適用生物指示物應(yīng)做出規(guī)定，并形成文件。

 

應(yīng)規(guī)定 IPCD、EPCD 的形式。

 

微生物學(xué)性能鑒定必須通過對符合 GB 18281.2 的生物指示物滅菌，證明該滅菌過程適合產(chǎn)品滅菌。

 

應(yīng)把這些指示物放置在整個(gè)被滅菌物品中具代表性的部位，所選的周期條件對微生物的殺滅力低于通常指定滅菌周期的殺滅力，達(dá)到保證無菌。

 

如果模擬產(chǎn)品滅菌的過程監(jiān)測器材和指示物一起用于 EO 滅菌的常規(guī)監(jiān)測，則對過程監(jiān)測器材的適合性應(yīng)予證實(shí)。

 

EO 滅菌指示物應(yīng)在預(yù)處理（若采用）前放置于被滅菌物品中，并且在整個(gè)滅菌周期中保持在該位置。（也有企業(yè)進(jìn)滅菌柜前放置）

 

應(yīng)規(guī)定產(chǎn)品的生物負(fù)載，并形成文件。相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)將包括微生物確認(rèn)方法和常規(guī)控制方法。

 

生物指示物應(yīng)放于產(chǎn)品中最難滅菌的位置，若產(chǎn)品的設(shè)計(jì)不能將生物指物放于其最難滅菌地方，則應(yīng)采用能提供已知數(shù)量活芽胞的芽胞懸液給產(chǎn)品染菌，芽胞懸液應(yīng)符合 GB 18281.2 標(biāo)準(zhǔn)。

 

使被染菌的產(chǎn)品表面芽胞均勻地分布于被滅菌物品中，但放置點(diǎn)應(yīng)包括滅菌條件下最難滅菌的地方。用于生物學(xué)性能鑒定的生物指示物的數(shù)量應(yīng)能驗(yàn)證整個(gè)被滅菌物品的微生物滅活。放置點(diǎn)的選擇可與進(jìn)行溫度監(jiān)測的位置相同，要想深入了解過程的有效性，應(yīng)將兩個(gè)生物指示物放置于每個(gè)熱電偶的附近。根據(jù)已鑒定的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，通常進(jìn)行這類微生物學(xué)試驗(yàn)宜采用以下生物指示物數(shù)量：

 

a)產(chǎn)負(fù)載體積小于等于 1m3時(shí)，至少 5 個(gè),日常監(jiān)控為 3 個(gè)；

 

b）滅菌器柜可用體積 5m3至 10m3時(shí)，每增加 1m3，應(yīng)增加 3 個(gè)生物指示物，日常監(jiān)控為驗(yàn)證的一半；

 

c）滅菌柜可用體積大于 10m3時(shí)，計(jì)算方式例如：18 m3 產(chǎn)品裝載: 10 × 3 + (18 − 10) ×

 

1 = 38，MPQ 時(shí)，至少用 38 個(gè) BI。日常控制: 38/2 = 19, 至少用 19 個(gè) BI。

 

方法：半周期法

 

本方法是在除時(shí)間外所有其他過程參數(shù)不變情況下，確定無存活菌的 EO 最短作用時(shí)間。規(guī)定的作用時(shí)間應(yīng)至少為最短滅菌時(shí)間 2 倍。還要進(jìn)行能讓存活菌復(fù)蘇的短周期運(yùn)轉(zhuǎn)，以證明復(fù)蘇技術(shù)的可靠性。

 

應(yīng)確定在確認(rèn)研究中用于復(fù)蘇生物指示物的條件，并形成文件。在確定培養(yǎng)時(shí)間時(shí)，應(yīng)考慮到EO 滅菌后芽胞有可能延遲生長。

 

生物指示物的培養(yǎng)時(shí)間：7 天，自含式培養(yǎng)周期 48 小時(shí)（需 RIT 驗(yàn)證，國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)無相關(guān)認(rèn)可規(guī)定）

 

8、生物指示物的生長檢驗(yàn)

 

滅菌后生物指示物應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),或采用自含式菌片，建議二種品牌 BI 進(jìn)行驗(yàn)證。

 

取出被滅菌產(chǎn)品中生物指示物，應(yīng)避免交叉污染與實(shí)驗(yàn)室污染（假陽性）使用自含式 BI 能解決假陽性問題。

 

經(jīng)培養(yǎng)后生物指示物的普通肉湯培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁，并符合枯草桿菌的特征，判為長菌。

 

根據(jù)微生物性能確認(rèn)試驗(yàn)及得到數(shù)據(jù)，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

 

作為驗(yàn)證滅菌工藝與制訂滅菌工藝依據(jù)。

 

培養(yǎng)基作陰性對照，BI 做陽性對照。

 

理想結(jié)果 ：

 

短周期：產(chǎn)品無菌，IPCD 陽性率低于 EPCD 陽性率

 

半周期：IPCD 合格、EPCD 合格或 EPCD 可低比例不合格。

 

全周期：EPCD 全部合格。

 

9、二次滅菌對產(chǎn)品影響的驗(yàn)證

 

由于一次滅菌的失敗，必須對產(chǎn)品進(jìn)行第二次滅菌，第二滅菌對產(chǎn)品是否有影響呢？

 

應(yīng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)對產(chǎn)品進(jìn)行感官、物理、化學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)檢驗(yàn)。特別對 EO 殘留量和 EO 反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行監(jiān)測，需要貯存多少天才能下降到安全水平，產(chǎn)品才能放行。

 

9、 殘留驗(yàn)證

 

應(yīng)對產(chǎn)品殘留進(jìn)行檢測，按 GB/T14233.1-2008 標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行試驗(yàn)。符合標(biāo)準(zhǔn)要求發(fā)行，

 

建立解析曲線。

 

10、車間空氣中 EO 濃度測定

 

 報(bào)警器

 

車間應(yīng)有排風(fēng)裝置，或滅菌柜內(nèi)微負(fù)壓排風(fēng)系統(tǒng)。降級(jí)工人出貨風(fēng)險(xiǎn)。

 

11、尾氣處理

 

 根據(jù)國家法規(guī)應(yīng)有尾氣處理裝置。請環(huán)保部門測定

 

有需要可以發(fā)郵件給 my_name1125@hotmail.com 索取。

 

12、噪音

 

請環(huán)保部門測定

 

目前國內(nèi)一些口罩生產(chǎn)商的滅菌工藝：

 

透析包裝、有預(yù)熱、解析間

 

預(yù)熱溫度 50±5℃

 

預(yù)熱濕度 40-85%RH

 

預(yù)熱時(shí)間 15H

 

轉(zhuǎn)移時(shí)間 小于 1 小時(shí)

 

滅菌溫度 50±5℃

 

真空度 -70Kpa

 

保壓時(shí)間 10min

 

加濕壓力 1Kpa 或者不小于 45%RH

 

保濕時(shí)間 10-30min

 

加藥量 40Kgpa 或 600mg/l

 

滅菌時(shí)間 300-420min

 

清洗真空度 -70Kpa

 

清洗次數(shù) 5 次

 

通風(fēng)時(shí)間 5min

 

解析溫度 45±5℃

 

換氣次數(shù) 4min/13min

 

解析時(shí)間 24-48H

 

透析包裝、有預(yù)熱、氮?dú)庵脫Q工藝

 

本套工藝對設(shè)備要求非常高，參考請注意！

 

預(yù)熱溫度 50±3℃

 

濕度 40-85%RH

 

預(yù)熱時(shí)間 15H

 

轉(zhuǎn)移時(shí)間 小于 1 小時(shí)

 

滅菌溫度 53±5℃

 

氮?dú)廪D(zhuǎn)換 -90Kpa

 

置換次數(shù) 1 次

 

真空度 -90Kpa

 

保壓時(shí)間 10min

 

加濕壓力 2Kpa 或者不小于 45%RH

 

保濕時(shí)間 10min

 

加藥量 35Kpa 或 600mg/l

 

滅菌時(shí)間 270-360min

 

氮?dú)馇逑?-90Kpa

 

次數(shù) 2 次

 

清洗真空度 -90Kpa

 

清洗次數(shù) 5 次

 

通風(fēng)時(shí)間 5min

 

無需解析（以最終殘留檢測結(jié)果為準(zhǔn)）

 

非透析包裝、無預(yù)熱、無解析間

 

滅菌溫度 45±3℃

 

保溫時(shí)間 1~5H 加藥前產(chǎn)品內(nèi)最低溫度應(yīng)升到 32 度 ---通過前面負(fù)載溫濕度均均性找出 真空度 -18~-25Kpa 部份包裝比較差的企業(yè)-15Kpa

 

保壓時(shí)間 10min

 

加濕壓力 2Kpa 或者不小于 45%RH 建議使用脈動(dòng)濕度控制加濕

 

保濕時(shí)間 10-30min

 

加藥量 45Kpa 或 800mg/l

 

滅菌時(shí)間 420-480min

 

清洗真空度 -15Kpa 回空大概在-3kpa，清洗真空速率和放空速率應(yīng)較低

 

清洗次數(shù) 5 次

 

通風(fēng)時(shí)間 30min 滅菌柜開門排風(fēng)風(fēng)機(jī)多排一段時(shí)間后再出貨。

 

自然解析：增加通風(fēng)有利于環(huán)氧乙烷釋放，解析時(shí)間會(huì)比較久。

 

滅菌過程中的壓力不得低于短周期驗(yàn)證的最低壓力。

 

注：同一種產(chǎn)品可以有很多滅菌工藝。

 

 不同的產(chǎn)品也可以使用同一種工藝。（加工組 ISO11135-2014）

 

追加等效: YY/T 1268-2015 環(huán)氧乙烷滅菌的產(chǎn)品追加和過程等效

 

很多企業(yè)現(xiàn)有滅菌工藝,可在對比上述工藝之后依據(jù) YY/T 1268-2015 將產(chǎn)品追加到已有的產(chǎn)品組中。將待追加產(chǎn)品與滅菌驗(yàn)證所使用最難滅菌的產(chǎn)品先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)中的附錄 A 進(jìn)行對比回答，若答案全是“否”，可直接追加至原有產(chǎn)品族中。若回答是，則需評(píng)估待選產(chǎn)品相關(guān)特性相比于已確認(rèn)的產(chǎn)品是否更有利于滅菌，更有利于滅菌也可直接追加至原有產(chǎn)品族。

 

也可參考 ISO11135-2014 規(guī)范性附錄 E 單批放行