影響濕熱滅菌的主要因素有：微生物的種類與數量、蒸汽的性質、藥品性質和滅菌時間等。

（1）流通蒸氣滅菌法：是指在常壓條件下，采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌，但不能保證殺滅所有芽孢，是非可靠的滅菌方法。

（2）間歇蒸汽滅菌法：利用反復多次的流通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法，但要重復3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜，目的是使芽胞發育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫，可將溫度降至75℃～80℃，加熱延長為30～60分鐘，并增加次數。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養基。

（3）高壓蒸汽滅菌法：103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3℃，維持15-20分鐘。

濕熱滅菌法 濕熱法可在較低的溫度下達到與干熱法相同的滅菌效果，因為：①濕熱中蛋白吸收水份，更易凝固變性；②水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能；③蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態變成液態可釋放出529卡熱能，可迅速提高物體的溫度。

濕熱滅菌法一般采用121℃，滅菌20-30min，如果是產孢子的微生物則應采用滅菌后適宜溫度下培養幾小時，再滅菌一次，以用于殺死剛剛萌發的孢子。