日常試驗中，經(jīng)常會遇到大腸桿菌需要觀察熒的是情況。國標4789.38-2012大腸埃希氏菌計數(shù)中第二法(VRBA-MUG計數(shù))，GB/T 5750.12-2006 水及水源水中的大腸埃希氏檢驗，都需要觀察熒光，可見熒光結(jié)果觀察的重要性。

MUG，是4-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷的縮寫，該物質(zhì)為β-半乳糖苷酶作用的底物，β-半乳糖苷酶與MUG結(jié)合并剪切β-半乳糖苷鍵，釋放熒光顯色基團4-甲基傘形酮，在紫外光(λ=366nm)下觀察，培養(yǎng)物發(fā)出藍色熒光。

一、觀察熒光的條件：

1)紫外光為366nm波長；

2)在黑暗的環(huán)境下觀察，有助于更好的觀察熒光；

3)紫外燈燈管最好直接照射在待測平板或試管上，無玻璃等物品吸收紫外光；

4)使用空白管、陽性菌、陰性菌做對照。

推薦使用“簡易便攜式熒光檢測燈”，不但具備以上三個要求，而且避免了紫外燈直接照射人的情況，對實驗人員有所保護。

二、空白產(chǎn)熒光原因分析：

1)試管或平皿洗涮不干凈所致。試管或平皿中殘留4-甲基傘形酮，會導致空白有熒光。2)觀察熒光的紫外燈不合適。紫外燈波長雖為366nm，但外側(cè)有玻璃燈罩、或者功率太大(瓦數(shù)太高、燈過亮)均會影響熒光效果。

3)試管或平皿本身原因。有些試管或平皿，本身由于質(zhì)量原因，在紫外燈下自身就帶有光亮。使用前，可以先拿幾種試管或平皿裝入蒸餾水，先在紫外燈下觀察一下，然后挑取亮度比較暗的容器使用。

建議：

建議做熒光試驗時，采用陽性對照菌同時觀察，可更簡單明了。