1、了解掌握單指示劑與雙指示劑甲醛滴定法測氨基酸總量的方法與原理：

二、單指示劑甲醛滴定法：

(一)原理：氨基酸具有酸、堿兩重性質，因為氨基酸含有-COOH基顯示酸性，又含有-NH2基顯示堿性。由于這二個基的相互作用，使氨基酸成為中性的內鹽。當加入甲醛溶液時，-NH2與甲醛結合，其堿性消失，破壞內鹽的存在，就可用堿來滴定-COOH基，以間接方法測定氨基酸的量，反應式可能以下面三種形式存在。

(二）試劑

(1)40％中性甲醛溶液，以麝香草酚酞為指示劑，用1N NaOH溶液中和。

(2)0.1％麝香草酚酞乙醇溶液。

(3)0.100N氫氧化鈉標準溶液。

(三)操作步驟：

稱取一定量樣品(約含20毫克左右的氨基酸)于燒杯中(如為固體加水50毫升)，加2-3滴指示劑，用0.1OON NaOH溶液滴定至淡藍色。加入中性甲醛20毫升，搖勻，靜置1分鐘，此時藍色應消失。再用0.1OON NaOH溶液滴定至淡藍色。記錄兩次滴定所消耗的堿液毫升數，用下述公式計算

計算：

氨基酸態氮(％)=( N V×0.014×100)/W                                

式中：

N：NaOH標準溶液當量濃渡。

V：NaOH標準溶液消耗的總量(m1)

W：樣品溶液相當樣品重量(克)。

0.014：氮的毫克當量。

三、標準