丙烯酰胺是一種不飽和脂肪酸，常見于高溫油炸或烘烤淀粉類食品中，如薯條、油條。歐盟食品安全局經過評估發現，歐洲民眾從油炸馬鈴薯、咖啡以及餅干等谷物食品中攝取了最多的丙烯酰胺。由于丙烯酰胺具有潛在的神經毒性、遺傳毒性和致癌性，因此食品中丙烯酰胺的污染引起了國際社會和各國政府的高度關注。

安譜實驗根據標準GB5009.204-2014，使用CNW Poly-Sery HLB SPE 小柱采用高效液相色譜方法，重點對復雜基質餅干和咖啡中丙烯酰胺進行檢測。該方法簡單易行，回收率數據良好，分別為84%、92%。

樣品前處理

餅干基質：

1、取粉碎好的餅干1g 于15ml 的離心管中，準確加入10ml 甲醇，渦旋混合2min，4000rpm 離心1min；

2、將上清液轉移至50ml 離心管中，殘渣按照步驟（1）重復提取一次；

3、合并兩次提取液，再向提取液中加入20ml 正己烷，劇烈振蕩1min；

4、除去正己烷層，再向下層清液中加入10ml 正己烷，劇烈振搖1min；

5、將下層清液轉移至燒瓶中，加入4ml 水，混勻；

6、40 度減壓旋蒸至小于2ml，待凈化。

咖啡基質：

1、取1g 咖啡粉于15ml 的離心管中，準確加入10ml 乙腈，渦旋混合2min，4000rpm 離心1min；

2、將上清液轉移至50ml 離心管中，殘渣按照步驟（1）重復提取一次；

3、合并兩次提取液，再向提取液中加入20ml 正己烷，劇烈振蕩2min；

4、除去正己烷層，再向下層清液中加入20ml 正己烷，劇烈振搖2min；

5、將下層清液轉移至燒瓶中，加入4ml 水，混勻；

6、40 度減壓旋蒸至小于2ml，待凈化。

小柱操作

小柱：SBEQ-CA3181 CNW Poly-Sery HLB SPE 小柱 150mg， 6mL

 活化：6ml 甲醇

 平衡：6ml 水

 上樣： 待凈化樣液

 洗脫：2*3ml 水( 方法：加入3mL 水于燒瓶中，多次潤洗后加到小柱上，重復以上操作一次)

 合并收集上樣和洗脫液，用水定容至10ml，過0.45um 親水PTFE后進行HPLC 分析。

 HPLC 測定條件